| 反應種屬 | 植物 |
| 檢測范圍 | 5ng/ml—80ng/ml |
| 物理性能 | 液體組分應澄清，無沉淀或絮狀物；所有組分應無包裝破損。 |
| 用途 | 用于檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織中植物維生素D(VD)的含量。 |
| 實驗原理 | 試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用生物素標記維生素D(VD)，純化的抗維生素D(VD)抗體包被微孔板，在競爭抑制反應中，一定量的固相抗體與生物素標記維生素D(VD)及非標記抗原（校準品或標本）進行抑制競爭反應，抗體與生物素標記的維生素D(VD)結合量受非標記抗原量所抑制，非標記抗原量多,抗體與生物素標記的維生素D(VD)結合就少，反之結合就多；反應平衡后，形成固相抗體-生物素化Syndecan-4，再加入酶標記的親和素，形成固相抗體-生物素化維生素D(VD)-酶標-親合素復合物。經(jīng)加底物顯色后，用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）。隨著維生素D(VD)濃度的升高，OD值逐漸下降呈良好的線性關系。本試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復性好、操作簡單、快速等特點，對血清中維生素D(VD)的減少或升高有可靠的檢出性能。 |
| 特異性 | 本試劑盒識別植物維生素D(VD)，與結構類似物無交叉。 |
| 重復性 | 板內，板間變異系數(shù)均<10%。 |
| 回收率 | 回收率在 85%-115%之間。 |
| 試驗所需自備試驗器材 | 1、酶標儀（450nm）2、精密移液器及一次性吸頭3、蒸餾水4、洗瓶或者自動洗板機5、37℃水浴鍋或恒溫箱6、500ml 量筒 |
| 操作程序 | 1.將各種試劑移至室溫平衡兩小時，取濃縮洗滌液，根據(jù)當批檢測數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋，混勻后備用。2.將預包被板從密封袋中取出，設一個空白對照孔，不加任何液體；每個校準品設2孔，每孔加入對應校準品50μl；其余每個檢測孔直接加待測血清或質控品50μl。3.除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50μl，混勻，貼上封板膜，置37℃溫育60分鐘。4.手工洗板：棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復3次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。5.每孔加入酶標親合素50μl（空白對照孔除外），混勻，貼上封板膜，置37℃溫育30分鐘。6.手工洗板：棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復3次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。7.每孔加顯色劑A50μl，顯色劑B50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。用酶標儀讀數(shù)，取波長450nm，先用空白對照孔調零點，然后測定各孔光密度值（OD值）。 |
| 注意事項 | 試劑盒檢測范圍不等同于樣本的濃度范圍，如果您的樣品中檢測物濃度 高于標準品最高值，請根據(jù)實際情況，做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗拉梯度，以確定稀釋倍數(shù))。 |
| 問題分析 | ①問題描述：標準曲線差可能原因及相應對策：1.試劑盒平衡時間不夠——不低于 2 個小時的室溫平衡2.吸取及洗滌不充分——充分的吸取及洗滌3.移液不精確——檢查和校正移液器②問題描述：精密度低可能原因及相應對策：1.洗滌不充分——按說明書要求充分洗滌和浸泡2.混勻不充分和吸取試劑不足——充分混勻和吸取試劑3.重復利用吸頭、容器和覆膜——使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的封板模4.加樣不精確——檢查和校正移液器③問題描述：O.D值低可能原因及相應對策：1.每孔加的試劑量不精確——校正移液器，精確加入試劑2.溫育時間不正確——保證充足的溫育時間3.溫育溫度不正確——試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度4.酶標記物或底物失效——通過混合酶標記物和底物，顏色迅速顯現(xiàn)來檢查5.沒有加入終止液——按照說明書實驗操作步驟加入終止液6.超出讀數(shù)時間讀數(shù)——在說明書推薦的讀數(shù)時間內讀數(shù)④問題描述：樣本值可能原因及相應對策：1.不正確的樣本儲存方式——正確儲存樣本，使用新鮮樣本進行實驗2.不正確的樣本收集和處理方法——采取正確的樣本收集和處理方法3.待測物質在樣本中含量低——使用新鮮樣本，重復實驗 |
| 聲明 | 試劑盒僅供研究使用，如將其用于臨床診斷或任何其他用途，我公司將不對因此產(chǎn)生的問題負責，亦不承擔任何法律責任。 |
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